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      PCR實驗室設計核心問題_四川華銳凈化工程有限公司

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      PCR實驗室設計核心問題
      發布時間:2022-04-08 05:43:17瀏覽次數:84

      PCR<a href="http://www.theslctd.com">實驗室設計</a>核心問題PCR實驗室設計核心問題

      PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發生污染,實驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實驗結果必須作廢,需重新進行實驗。所以發生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是排除。

      實驗室空調通風系統設計及壓力控制 
      PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。 2.1試劑貯存和準備區 
      該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制,本區并沒有嚴格的要求。 

      標本制備區 
      該區域主要進行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增產物 分析區 試劑貯存和準備區 
      標本制備區 擴增反應混合物配制和擴增區 緩 沖 區 傳遞窗
      本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。

      擴增反應混合物配制和擴增區 
      該區域主要進行的操作為DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。 
      本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

      擴增產物分析區 
      該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。 
      本區是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。 

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